Гистологическое исследование: когда оно назначается, как проводится и что показывает

Среди основных методов лабораторной диагностики новообразований, гистологическое исследование биопсийного материала занимает одно из главных мест. Оно позволяет оценить структуру и состояние клеток с высокой точностью и установить правильный диагноз, а также контролировать эффективность проводимой терапии.

Гистологическое исследование — это метод оценки клеток биоптата (образца пораженной ткани), проводимый с помощью микроскопа. Несмотря на свою простоту, данный метод довольно сложен, так как он предусматривает различные технологии обработки биоматериала и методы микроскопии.

В качестве биоматериала для исследования используются образцы различных тканей, включая кожу, слизистые оболочки и мышцы. Кроме того, иногда гистологическому исследованию подвергают мазок, то есть клетки эпителия, которые сняты специальной мягкой щеточкой.

Интересно отметить, что первые шаги в развитии гистологии были предприняты еще врачами античности и средневековья. Такие светила медицины, как Авиценна и Везалий, уже тогда уделяли большое внимание изучению тканей. Однако изучение клеток на уровне микроскопа стало возможным только в 17 веке, после изобретения первого микроскопа.

Методы анализа микроскопических объектов могут отличаться по способу микроскопии, выбор которого зависит от целей исследования - предпочтительно ли качественное или количественное определение, выявление внешних патологий структур или химического состава.

Существует несколько методов микроскопии, которые широко применяются в современных лабораториях:

• Световая микроскопия позволяет проводить наблюдения в видимой части спектра;
• Фазово-контрастная микроскопия - метод, который выявляет различия в индексах преломления света в естественных объектах, без их окрашивания. Темнопольная микроскопия является разновидностью этого метода, дающая негативное изображение;
• Интерференционная микроскопия даёт возможность производить количественные морфологические измерения и определять концентрацию вещества в клетке;
• Поляризационная микроскопия (оптическая микроскопия) может использоваться для определения характера расположения молекул в клетке;
• Люминесцентная (флуоресцентная) микроскопия - метод окрашивания, который позволяет наблюдать объекты, светящиеся во флуоресцентном освещении;
• Ультрафиолетовая микроскопия позволяет проводить наблюдения в ультрафиолетовой части спектра;
• Электронная микроскопия - метод, который использует направленный поток электронов вместо света;
• Радиоавтография - исследование, основанное на использовании изотопных меток, которое позволяет оценить скорость обменных процессов в клетке;
• Цитоспектрофотометрия - метод, позволяющий провести вычисления концентрации увеличенных фотометрических величин в отдельных клетках.

Назначение гистологического исследования: когда это необходимо?

Гистологическое исследование — метод диагностики, который используется во многих областях медицины. Особенно ценен этот метод при изучении новообразований — он позволяет определить их характер (доброкачественный или злокачественный), скорость роста, результативность терапии. Гистологические исследования широко используются в таких областях, как гастроэнтерология, оториноларингология, гинекология, урология, гематология, пульмонология, нефрология и других.

Гистологическое исследование обязательно назначается при подозрении на опухоль, а также для определения стадии процесса. Его проводят перед назначением противоопухолевой терапии и во время лечения для контроля его эффективности (а также при необходимости — его коррекции).

Противопоказаний данного метода практически нет, главное, чтобы была возможность взять биоптат. Однако ограничениями для проведения гистологического исследования могут стать нарушения свертываемости крови и аллергия на анестетики, тромбоцитопения, риск прерывания беременности, если исследование проводят женщине, ожидающей ребенка, а также некоторые заболевания, в частности, сердечная недостаточность.

Гистологическое исследование включает в себя ряд этапов.

Первый этап - подготовка материала. Пробы биологических тканей, полученных от пациента в рамках диагностического процесса, предварительно фиксируют в формалине, чтобы остановить биохимические процессы в клетках.

Второй этап - удаление воды. После фиксации ткань промывают и дезгидратируют в спирте разной концентрации. Это необходимо для того, чтобы удалить воду из клеток и заменить ее на спирт, который лучше переносят последующие этапы обработки.

Третий этап - проникновение в таксолог. В ткань вводят смесь таксола и парафина, которые смешиваются со спиртом. Это помогает удалить спирт из ткани и заменить его на парафин, который защищает ткани от повреждений и сохраняет их структуру.

Четвертый этап - формирование блока. Ткань помещают в металлические формы, в которых застывает парафин. В итоге получается блок, который можно нарезать на тонкие срезы размером до нескольких микрометров.

Пятый этап - получение микроскопических срезов. Раскрой блока происходит в микротоме, и ткань нарезают на срезы, которые окрашивают специальными красителями.

Шестой этап - получение гистологического препарата. Тонкие срезы клеят на стеклянную пластинку и закрепляют лаком. Гистологический препарат готов.

Следует отметить, что гистологическое исследование является важным этапом в диагностическом процессе и может помочь выявить ряд заболеваний.

Подготовка к проведению биопсии

Способ и место забора биоптата играют важную роль в подготовке к процедуре. Обычно биопсия проводится утром. Однако, желательно проводить процедуру натощак, поскольку часто она осуществляется при помощи местного наркоза или седации. В связи с этим, последний прием пищи должен состояться не позднее, чем за 8 часов до начала процедуры.

В статье рассматриваются различные методы взятия биоптатов для гистологического исследования.

Один из способов - хирургическая операция или инцизионная биопсия. В ходе этой процедуры врач берет образец пораженной ткани.

Еще одним методом является щипковая биопсия, при которой образец материала забирают специальными щипчиками, которые могут быть введены эндоскопическим способом.

Для забора материала толстой иглой используют пункционную биопсию. Этот метод широко распространен для получения образцов клеток из печени и простаты.

Еще одним методом является аспирационная биопсия, при которой образец тканей получают путем отсасывания их трубкой. Этот способ используют для биопсии миоматозных узлов, узлов щитовидной железы, и др.

Эксцизионная биопсия - это хирургическое удаление пораженных органов и тканей для их последующего исследования.

Трепан-биопсия применяется для забора жидкостей из костной ткани. Кюретаж - это соскабливание небольшого количества ткани из полости при помощи специальной ложечки-кюреты с острыми краями.

Мазок, с другой стороны, представляет собой забор клеток слизистых оболочек тонкой щеткой, как тушь для глаз.

Важной характеристикой взятия биоптата является безопасность процедуры: она проводится под контролем ультразвукового исследования, поэтому риска повреждения органов нет.

Анализ материала

В медицине существуют две основные методики проведения гистологического исследования.

Традиционный подход предполагает обработку полученного биоптата с помощью фиксирующего вещества, которое предотвращает его разложение под действием ферментов, а также его сгущение путём заливки парафином. Затем готовый препарат нарезают микротомом на «ломтики» толщиной около 8 мкм и окрашивают. После этого препарат изучают при помощи микроскопа и делают заключение. Обычно результаты исследования становятся доступными через 7 до 10 дней, однако для исследования костной ткани может потребоваться около 2 недель.

Иногда результаты гистологического исследования необходимы врачу немедленно, в течение часа, например, при проведении операции, когда врачей волнует вопрос о немедленном удалении или сохранении органа. В таких случаях применяется ускоренная методика гистологического исследования, при которой биоптат замораживают, нарезают микротомом и проводят микроскопию немедленно. Такой подход занимает всего лишь час или ещё меньше.

Значительно чаще для гистологического исследования выбирают биоптат, расположенный на границе между здоровой и пораженной областями.

Принципы трактовки результатов гистологического исследования

В медицине гистологическое исследование является одним из самых точных методов лабораторной диагностики. Ошибки крайне редки и могут быть вызваны только нарушением технологии при заборе биоматериала. Результат гистологического исследования выдается в виде медицинского документа, который может интерпретировать только врач.

Бланк результатов гистологического исследования содержит имя и данные пациента, дату и место забора биоматериала, тип исследованных тканей, способ исследования, а также список растворов и препаратов, использованных во время подготовки образца тканей.

Объем заключения гистологического исследования может вызывать беспокойство у пациентов, поскольку оно может включать огромное количество названий тканей. Однако не следует беспокоиться зря, поскольку в заключении специалист описывает все типы обнаруженных тканей, даже если они совершенно здоровы.

Каждый тип тканей оценивается по нескольким параметрам, таким как цвет, консистенция и плотность, наличие изменений, не вписывающихся в норму, например, прорастание и размягчение.

Исследование: сколько стоит?

Многие хотят знать, сколько стоит гистологическое исследование. Оно может выглядеть сложным, но на самом деле оно не так уж дорого. В муниципальных медицинских учреждениях, если у пациента есть полис, оно делается бесплатно. Единственный недостаток заключается в том, что государственные лаборатории могут быть перегружены, что приводит к длительному ожиданию направлений на биопсию и результатов анализа. По этой причине многие соглашаются заплатить за услуги, чтобы пройти исследование быстрее.

Стоимость гистологического исследования в коммерческих лабораториях составляет примерно от 3000 до 4000 рублей. Стоимость биопсии, как таковой, начинается от 1500–2000 рублей и может доходить до 8000 рублей в зависимости от сложности, способа проведения и типа биоматериала.

Однако, проведение гистологического исследования требует, чтобы технология забора биоптата, его упаковки и перевозки была строго соблюдена. Это особенно важно, если транспортировка биоматериала от места забора до лаборатории будет долгой. Поэтому желательно, чтобы забор и исследование материала проходили в одном и том же месте (если есть такая возможность) в лаборатории, оснащенной современным оборудованием.

Фото: freepik.com